美国约翰霍普金斯大学Taekjip Ha、Bin Wu等研究人员合作开发出超快CRISPR技术。

该项研究成果发表在2020年6月12日出版的《科学》杂志上。

研究人员开发了一种笼状的RNA策略,该策略能够让Cas9结合DNA,但在光诱导的激活作用下才能剪切。

这种方法被称为超快CRISPR(vfCRISPR),可在亚微米和秒级产生双链断裂(DSB)。

同步切割改善了对DNA修复的动力学分析,揭示了细胞在几分钟内对Cas9诱导的DSB作出反应,并且在DNA连接后可以保留MRE11。

DNA损伤后H2AX的磷酸化每分钟传播100多个碱基,达到30兆碱基。

使用单细胞荧光成像,研究人员表征了53BP1修复灶形成和溶解的多个周期,第一个周期比随后的周期更长,并且其持续时间受修复抑制作用的调节。

成像引导的亚细胞Cas9激活进一步促进了单等位基因分辨率的基因组操作。

vfCRISPR可以在空间、时间和基因组坐标上进行高分辨率的DNA修复研究。

据悉,CRISPR-Cas系统提供了用于可编程基因组编辑的多功能工具。

来源:小柯生命

相关论文:

https://science.sciencemag.org/content/368/6496/1265

小柯报道:

http://news.sciencenet.cn/htmlpaper/2020/6/20206141493039456993.shtm