关注微旋基因公众号并转发本文集赞50

截图发给微信号:18500298321

60余种质粒免费送

关注“微旋基因”公众号后台回复关键词“免费质粒

即可查询质粒清单

每人限选一种

始于2019年底的这场新冠疫情已经肆虐将近整个2020年,仍然没有消退的迹象,绝大多数人的生活轨迹也在这一年被改写。除了奋战在一线的医务人员(致敬!)外,广大的科研人员,尤其是生物医学相关专业的从业者,也在日夜不倦的为抗击新冠肺炎疫情做出贡献。


2020年的诺贝尔化学奖也是在这样特殊的背景下授予了CRISPR基因编辑技术的开拓者Emmanuelle CharpentierJennifer A. Doudna


虽然著名华人生物学家张峰未能入围,但其领导的实验室基于CRISPR开发的基因检测技术和高通量筛选技术在新冠病毒的研究和检测中表现亮眼,这其中最惊艳的工作就是涉及CRISPR全基因组筛选新冠病毒感染的相关基因。


国际著名期刊Cell杂志近期背靠背发表了两篇相关的工作,分别来自于耶鲁大学和纽约基因组研究中心。上述两个小组利用CRISPR全基因组筛选系统分别的人肺泡上皮细胞和猴肾上皮细胞中,针对SARS-CoV2感染的相关基因进行了筛选
下面我们来详细了解下这两个研究的技术路线。
两个研究均选择了全基因组的敲除文库(包括122,411条gRNA,靶向人19,050个基因。文库链接:https://www.addgene.org/pooled-library/zhang-human-gecko-v2/;关于文库的选择可以参考addgene网站,选择实验需要的文库)。

首先两个研究小组利用包装好的全基因组CRISPR基因敲除文库对相应的靶细胞进行感染,感染的MOI系数均选择了0.2(所谓的“僧多粥少”策略,目的是确保绝大多数的细胞感染的慢病毒不超过一个)。不同的是人肺泡细胞的筛选中首先在细胞中稳转ACE2基因,以确保SARS-CoV2对细胞的感染效率。没有感染成功的细胞通过加嘌呤霉素筛选去除。


将上述突变细胞库感染SARS-CoV2病毒,培养后,通过高通量测序技术分析比对在SARS-CoV2感染过程中丢失的基因。

有意思的是,两个研究中筛选的基因合集只有ACE2和CTSL两个基因是重合的。因此不同的物种或者不同的筛选策略可能会影响最终的实验结果。


CRISPR技术之所以能快速斩获诺贝尔奖,根本原因是其对整个生物医药领域带来的革命性的进步,尤其是类似上述案例中的高通量筛选策略。


CRISPR技术正被越来越多的研究人员用来改造人类基因以消除疾病,创造生命力更加顽强的植物,消灭病原体等。


CRISPR技术不仅能够在不同物种中对特定的基因进行敲除,敲入等,经过改造后还能在转录水平调控基因的表达或者沉默、对特定的基因进行原位标记、在细胞水平或体内对单碱基进行编辑(BE2,BE3,ABE等)、体外系统中用于病原微生物或者基因突变的检测等(Sherlock、DETECTR);此外,通过与慢病毒或AAV技术联合可以轻松在全基因组水平进行基因快速筛选,David Liu研究小组与2019年实现了无模板的基因敲入技术。


随着研究的深入,CRISPR/Cas9系统的应用更加便捷、高效,也更广泛,目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌等基因组精确修饰,成为科研人员的强大工具,基于CRISPR临床实验已经取得初步成功。为了让更多的科研人员及时全面的掌握CRISPR最新技术,获得基因编辑质粒系统。特于2020年12月5日至12月6日在深圳大学丽湖校区举办CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班。


课程福利

所有参加培训的老师均可获得:

1. 免费基因编辑质粒载体一份:可以用于哺乳动物、植物、真菌、细菌、斑马鱼、线虫等,共60余种);

2. 免费赠送sgRNA离线设计软件(有基因组DNA序列即可设计!);

3. 分子生物学免费软件安装包一套(snapgene,premier6,Graphpad6.01,亿图图示专家-技术路线图绘制,Endnote,Flowjo等);4. 免费获得信号通路图制作神器- Biomedical-PPT-Toolkit-Suite。

扫码报名培训班

报名链接:

http://micro-helix.mikecrm.com/OOA1nzY

 举办地点

深圳大学丽湖校区 (广东省深圳市南山区学苑大道田寮大厦1楼深圳雅园塘朗酒店会议室) 参加对象

从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。 

授课方式

理论讲授。 

收费标准

注册费:理论授课 3500元/人(培训提供免费午餐),2020年11月30号之前汇款报名可以优惠至:3300元/人。同一个单位三个人以上报名可以免费构建价值1500元的质粒一个。 

推荐酒店:(食宿费用自理)

深圳雅园塘朗酒店 银行汇款

北京微旋基因技术有限公司 

开户行:中国建设银行北京宣武支行 

账  号:11001019500053058529

备  注:银行转账的学员,请于汇款单备注栏内注明参会人姓名 联系人

许老师   18500298321   010-53516075       

sales@micro-helix.com 承办单位

北京微旋基因技术有限公司

文末福利:
关注微旋公众号,发送下图中的关键词,会有福利资源哦~